產(chǎn)品簡(jiǎn)稱(chēng):平滑肌細胞
產(chǎn)品名稱(chēng):平滑肌細胞
規格:瓶
貨號:E1242
產(chǎn)品名稱(chēng) | 平滑肌細胞 |
單位 | 瓶 |
貨號 | E1242 |
帛科細胞工廠(chǎng)適用于工業(yè)批量 ,如疫苗,單克隆抗體或者制藥工業(yè),也適用于實(shí)驗室操作和大規模細胞培養。方便實(shí)用,有效避免污染。
細胞的凍存:
1.先將凍存管放入4℃冰箱,約40min。
2.接著(zhù)置于-20℃冰箱,約30-60min。
3.置于-80超低溫冰箱中放置過(guò)夜。
4.置于液氮罐中長(cháng)期保存。
5產(chǎn)品僅用于科研同時(shí)做好凍存記錄,在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。
注意事項:
1.使用DMSO前,不需要進(jìn)行高壓滅菌,它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會(huì )破華它的分子結構,以至于降低冷凍保護效果。在常溫下,DMSO對人體有害,故在配制時(shí)*戴上手套操作。
2.不宜將凍存細胞放置在0℃~-60℃這一溫度范圍內過(guò)久,低溫損傷主要發(fā)生在這一溫度區內,是“危險溫區”。
3.注意定期檢查液氮罐內液氮量,及時(shí)添加。
具體步驟:
平滑肌細胞一. 水的制備:
帛科細胞培養用水必須非常純凈,不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水
二.PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制):
1.溶解定容:將藥品(NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HPO4·H2O 1.56g,KH2PO40. 2g )倒入盛有雙蒸水的燒杯中,玻璃棒攪動(dòng),充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中準確定容至1000ml,搖勻即成新配制的PBS溶液。
2.移入溶液瓶?jì)却荆簩?/span>PBS倒入溶液瓶(大的吊針瓶)內,蓋上膠帽,并插上針頭放入高壓鍋內8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補充蒸發(fā)掉的水份。
三. 胰蛋白酶溶液的配制與消毒:
胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細胞離散。不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān),在pH為8.0、溫度為37℃時(shí),胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶時(shí),應把握好濃度、溫度和時(shí)間,以免消化過(guò)度造成細胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液時(shí)應選用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks液。終止消化時(shí),可用含有血清培養液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細胞的作用。
1.稱(chēng)取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度為0.25%,用電子天平準確稱(chēng)取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水(若用雙蒸水需要調PH到7.2左右)或PBS(D-hanks)液中。攪拌混勻,置于4℃內過(guò)夜。
2.用注射濾器抽濾消毒:配好的胰酶溶液要在超凈臺內用注射濾器(0.22微米微孔濾膜)抽濾除菌。然后分裝成小瓶于-20℃保存以備使用。
細胞計數:
1.蓋好蓋玻片:取一套血球計數板,將特制的蓋玻片蓋在血球計數槽上。
2.制備計數用的細胞懸液:用吸管吸5滴細胞懸液到一離心管中,加入5滴臺盼藍染液(0.4%)或苯胺黑,活細胞不會(huì )被染色,加入染液后就可以在顯微鏡下區別活細胞和死細胞。
3.將細胞懸液滴入計數板:將待測細胞懸液吹均勻,然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入,要保證蓋片下充滿(mǎn)懸液,注意蓋片下不要有氣泡,也不能讓?xiě)乙毫魅肱赃叢壑小?/span>
4.統計四個(gè)大格的細胞數:將血球計數板放于顯微鏡的低倍鏡下觀(guān)察,并移動(dòng)計數板,當看到鏡中出現計數方格后,數出四角的四個(gè)大鉻(每個(gè)大格含有16個(gè)中鉻)中沒(méi)有被染液染上色的細胞數目。
5.計算原細胞懸液的細胞數:按照下面公式計算細胞密度:
(細胞懸液的細胞數)/ml= ( 四個(gè)大格子細胞數/4) ×2×104
說(shuō)明:公式中除以4因為計數了4個(gè)大格的細胞數。
公式中乘以2因為細胞懸液于染液是1:1稀釋。
公式中乘以104因為計數板中每一個(gè)大格的體積為:
1.0mm(長(cháng))×1.0mm(寬)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3
油酸鋁1公斤 HumanIerferonα/βReceptor,IFN-α/βRELISAKit 人α/β干擾素受體(IFN-α/βR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
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4-基咪坐;5-基咪坐;4-基甘噁啉 4-MqthyliMidczolq;4-Mqthylglyoxclinq 8-36-6 Humaninsulin-likegrowthfactors1,IGF-1ELISAKit人胰島素樣生長(cháng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規格:96T/48T
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(三(羥甲基)甲基)甘酸 GuineapigLebtospiraIgGELISAKit豚鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒規格:96T/48T
藍色瓊脂糖凝膠6FFshēng huà shì jì容量:25毫克 人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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(酸鈉) humanglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISA試劑盒人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒規格:96T/48T
一縮二乙二醇shēng huà shì jì容量:100克 組織單胺氧化酶A型(MAO-A)活性比色法定量檢測試劑盒20次
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(*)Calcium peroxide Mouseα-L-iduronidase,IDUAELISA試劑盒小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
尿(雜)環(huán),英文名或英文縮寫(xiě):Purine,級別:USP級,50mg/ml,規格:5克 GoatPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISA試劑盒山羊化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒規格:96T/48T
黃 yellow,95% 8004-92-0 1G 通用試劑 Humanai-BullousPemphigoid180aibody,BP180-AbELISAKit人抗BP180抗體(BP180-Ab)ELISA試劑盒規格:96T/48T
固紅RC鹽 Fcst rqd RC sclt;DiczoniuM sclt of 4-chloro-2-cMinocnisolq;Diczotizqd 4-chloro-o-cnisidinq;2-cMino-4-chlorocnisolq diczotctqd doublq sclt;Diczo rqd RC;czoic diczo 0;C.I. 37120 822--8 人表皮生長(cháng)因子受體2(Her2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝